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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3983 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
曼那角病毒PCR检测试剂盒供应 | Menangle virusRTPCR | BKP3983 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
HO-8910 人细胞SSPEBUFFER,0.1X,WITH0.2%SDS 0.1X SSPE 缓冲液,含 0.2% SDS超级透明无色液体RTsigma
ZR-75-30人癌细胞 Human breast cancer cell line ZR-75-30 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,3-二流代坊 97% 1,3-DITHIOLcNq 489-4-3
FIGF Protein Rat 重组大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签)言醋二双胍相关物质B MqtforMin Rqlctqd CoMpound B;1-Mqthylbigucnidq xy7nochloridq 1674-6-0
大鼠星形胶质细胞(RA)(5×105) Caki-1, 人肾透明细胞癌细胞 Human二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)本基],英文名或英文缩写:Triton x-114,级别:BR,85%,规格:100毫克
非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6)Adenosine 10g/25g/50g/100g Amresco 0325
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸多佐胺;盐酸杜塞酰胺(标准品)Dorzolamide HCl质量规格:HPLC>98%,标准品
鱼源细胞甲磺酸多沙唑嗪Doxazosin Mesylate质量规格:>99%,BR
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸多沙唑嗪(标准品)Doxazosin Mesylate质量规格:HPLC>98%,标准品
II型胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL盐酸多柔比星/盐酸阿霉素Doxorubicin HCl/Adriamycin质量规格:>98%,BR
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒构建稳定株)人 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS盐酸多柔比星/盐酸阿霉素(标准品)Doxorubicin HCl/Adriamycin质量规格:HPLC>98%,标准品
曼那角病毒PCR检测试剂盒供应GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿托伐醌,阿托喹酮(标准品)Atovaquone质量规格:HPLC>98%,标准品
人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1阿昔洛韦钠盐Acyclovir 质量规格:美国进口
CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿昔洛韦单1酸盐Acyclovir Monophosphate 质量规格:美国进口
COLO320/DM 人细胞阿昔洛韦-d4Acyclovir-d4 质量规格:美国进口
HCT 116人细胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSN2-乙酰基-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)鸟嘌呤(阿昔洛韦杂质)N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)质量规格:美国进口
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 色素细胞生长培养基M2型套装,无酚红 500mlDIOP邻本二酸二辛酯100克CP,94%
平滑肌细胞培养基SMCM-sf-prfdl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) DAOS
转化细胞STREPTAVIDIN链霉亲合素生物技术级25MG
P3X63Ag8细胞,细胞 人十二指肠腺癌细胞,HuTu-80细胞 CM-H029人脐带单核细胞完全培养基100mL3012-65-5柠檬酸氢二铵;枸橼酸氢二铵;二碱式柠檬酸铵AMMoniuM dibasic;AMMoniuM xy7nogen ;Citric acid diaMMoniuM salt
特点优势:
1. 特异性:曼那角病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。