技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：犬小孢子菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
KYSE450 橘霉素，英文名或英文缩写：Citrinin，级别：组织培养级，10KU/ml，规格：500毫克

RL95-2人细胞 Human endomeial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培养基+10%FBS十六烷基二基基溴化铵 (EHDAB) CqTYLDIMqTHYLqTHYLcMMONIUM BROMIDq 2014/3/8

HGF Protein Mouse 重组小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 标签)SULFATEHEPTAHYDRATE,七水ACS级白色粉末RTsigma

小小神经胶质细胞(MM)(5×105) RBE, 人肝细胞 Human葡糖酸钾盐，英文名或英文缩写：potewwium gluconate，级别：土豆来源，规格：1克

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化)4-Chloro-1-Naphthol 5g/10g/25g/50g原装 Amresco 0398
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)质量规格：>90.0%(T)

小鼠子细胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)质量规格：>95.0%(T)

METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

CM-M001小鼠肺微内皮细胞完全培养基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格：>98.0%(T)

Hela, 人细胞系 小鼠成纤维细胞,3T3TK细胞 SPA-A1()4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)质量规格：>96.0%(HPLC)
犬小孢子菌PCR检测试剂盒供应JEG-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 轮环藤宁四乙酸/1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid质量规格：>95%

人成细胞;Saos-2p, p’-DDE(标准品)p, p’-DDE质量规格：分析标准品

PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) p, p’-DDE标准溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution质量规格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(人瘤细胞)5×106cells/瓶×2敌草腈(标准品)Dichlobenil质量规格：分析标准品

人绒毛膜内皮细胞 人胚胎皮肤成纤维细胞，CCC-ESF-1细胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母细胞)乙二醇苯(标准品)Ethylene glycol monophenyl ether质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)
CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 标签)偏钒酸钠shēng huà shì jì容量：0.25毫升

MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-

猫肾细胞;CRFK正shēng huà shì jì容量：100克

人颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 )马丁肉汤shēng huà shì jì容量：RT支

CL-0099HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞)5×106cells/瓶×278-79-5, 99%Isoprene