PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：致病性大肠杆菌通用PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

22-Dehydroclerosteryl acetate  28594-00-5  中文名：  分子式：C31H48O2  度：93.0%  关键词：  大叶桂樱; 豆甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠琥珀酸脱氢酶elisa试剂盒   小鼠琥珀酸脱氢酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠琥珀酸脱氢酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠琥珀酸脱氢酶试剂盒、小鼠琥珀酸脱氢酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

22-Dehydroclerosterol glucoside  143815-99-0  中文名：  分子式：C35H56O6  度：%  关键词：  ; 豆甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原elisa试剂盒   大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原试剂盒、大鼠凝血因子Ⅷ相关抗原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氢赤桐甾醇  分子式：C29H46O  度：94.0%  关键词：  抗菌; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  大鼠凝血酶抗凝血酶复合物elisa试剂盒   大鼠凝血酶抗凝血酶复合物试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠凝血酶抗凝血酶复合物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠凝血酶抗凝血酶复合物试剂盒、大鼠凝血酶抗凝血酶复合物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

21-Deoxyneridienone B  924910-83-8  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  关键词：  孕甾烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体elisa试剂盒   大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体试剂盒、大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物受体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

20-Hydroxyecdysone  5289-74-7  中文名：20-羟基蜕皮甾酮  分子式：C27H44O7  度：98.0%  关键词：  ; ; ; 蜕皮甾; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠呼肠孤病毒3型抗体（RV-3Ab）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
sVE-Cadherin   作用：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender  Otophylloside F  中文名：青阳参苷F  分子式：C48H76O16 

Borate,Decahydrate   500g                 4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名：  分子式：C11H11NO2 

Bite   1kg  4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  188742-80-5  中文名：4,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯  分子式：C26H26O12 

SOD   3KU                 Amoxicillin  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S 

Skimmilk   500g  Amoxicillin trihydrate  61336-70-7  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S
致病性大肠杆菌通用PCR检测试剂盒供应大鼠源细胞 Butt's 瘤细胞，NAMALWA细胞 LLC-MK2细胞，绿猴恒河猴肾细胞咪唑烟酸(标准品)质量规格：HPLC>99%,标准品Imazapyr acid

Hela, 人细胞系 Human石胆酸(标准品)质量规格：>97(GC),标准品Lithocholic Acid

ADIPOQ Others Mouse 小鼠 ADIPOQ / ACDC / Adiponectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧嗪酸钾质量规格：>98%Potassium Oxonate

铁硒传递蛋白 100xITS氧嗪酸钾(标准品)质量规格：>98%,标准品Potassium Oxonate

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人细胞裂解液 (阳性对照) 绵马酸ABA（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Filixic acid ABA
人胚肺二倍体细胞;HEL-1 人胃粘膜上皮细胞完全培养基 100mL大豆分离蛋白shēng huà shì jì容量：RT50克

人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg2 2 4 4 5-五溴联本迷 2,2',4,4',5-PqNTcBROMODIPHqNYL qtqr 60348-60-9

LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬酸shēng huà shì jì容量：5克

牛胚气管细胞;EB (NBL-4)Φ60mm细胞培养皿shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

A172细胞，胶质母细胞瘤细胞 ,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205300-87-83，5-二甲基异唑，97%3,5-Dimetxylisoxazole
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。