PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：小双节病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3  度：98.0%  小鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

6-Aminoindazole  中文名：6-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%  小鼠层连蛋白/板层素(LN)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

(R)-(+)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名：(R)-(+)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO  度：98.0%  小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

N4-Benzoyl-2'-deoxycytidine  中文名：N4-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C16H17N3O5  度：98.0%  小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine  中文名：N6-苯甲酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脱氧腺苷  分子式：C38H35N5O6  度：98.0%  小鼠正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
大鼠血小板生成素(TPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Periplocoside M  116782-73-1  中文名：北五加皮苷M  分子式：C34H52O9 

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子elisa试剂盒   大鼠纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠纤溶酶原激活物抑制因子试剂盒、大鼠纤溶酶原激活物抑制因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Sulfamonomethoxine  中文名：磺胺间甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S 

大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1elisa试剂盒   大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1试剂盒、大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Sulfamonomethoxine  1220-83-3  中文名：磺胺间甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S  度：98.0%   

大鼠纤溶酶原激活物抑制物elisa试剂盒   大鼠纤溶酶原激活物抑制物试剂盒   规格型号：96T/48T   大鼠纤溶酶原激活物抑制物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：大鼠纤溶酶原激活物抑制物试剂盒、大鼠纤溶酶原激活物抑制物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Sulfamonomethoxine  1220-83-3  中文名：磺胺间甲氧嘧啶  分子式：C11H12N4O3S 

大鼠维生素C(VC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tolvaptan  150683-30-0  中文名：托伐普坦  分子式：C26H25ClN2O3  度：98.0%  关键词：
小双节病毒PCR检测试剂盒说明书仓鼠卵巢细胞;Lec1 高转移细胞，HO-8910PM细胞 SCF细胞，白鲢尾鳍细胞卡洛芬乙酯 (卡洛芬杂质)质量规格：美国进口Carprofen Ethyl Ester (Carprofen Impurity)

人肾皮质近曲小管上皮细胞;HK-2外消旋卡洛芬-d3质量规格：美国进口rac Carprofen-d3

HA Others H5N1 甲型 H5N1 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 长春质碱-d3质量规格：美国进口Catharanthine-d3

原代肝实质细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml阿苯达唑砜质量规格：美国进口Albendazole Sulfone

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利酰基-α-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Perindopril Acyl-α-D-glucuronide
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人细胞裂解液 (阳性对照) 2′-脱氧腺苷250克

人间充质干细胞-脂肪季务四醇鳞醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0

AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 二硫代苏糖醇100克

人角膜细胞RNAHK miRNA5 μg四化1克

7721细胞，7721细胞 人细胞(结转移),NCI-H292细胞 人间充质干细胞-脂肪98103-87-82-本基-1-;β-本;2-本;β-羟基异本;β-甲基本基乙醇2-pxenyl-1-propanol;2-pxenylpropyl alcohol;β-xy7noxyisopropylbenzene;β-metxylpxenetxyl alcohol;β-xy7noxycuMene;xy7notropic alcohol
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。