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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4186 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
三日PCR检测试剂盒说明书 | Plasmodium malariaePCR | BKP4186 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Ampicillin Trihydrate 中文名:氨苄西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0% 小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0% 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
二氧化快速测试盒 dioxide rapid test case α-Spinasterol glucoside 中文名:α-菠甾醇葡萄糖苷 分子式:C35H58O6
二氢二醇脱氢酶 英文名称: Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2 规格: 48T/96T 英文缩写: DDH2 3β-Hydroxyporiferast-5-en-7-one 145163-97-9 中文名: 分子式:C29H48O2
二硫赤鲜醇 5g 3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0%
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)试剂盒 紫外分光光度法 50管/48样 4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di 106261-49-8 中文名:甲磺酸伊马替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2
二0酸核糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)试剂盒 紫外分光光度法 25管/24样 4,9-Dihydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O5 度:98.0%
三日PCR检测试剂盒说明书WI-38细胞,人二倍体胚肺细胞 人,LTEP-a-2细胞 QBC-939, 人细胞N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)N-Trimethylsilylacetamide
猫肾细胞;CRFK1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)1,1,3,3-Tetramethyldisilazane
NA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 神经氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))质量规格:>98.0%(T)1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole
CL-0386MPC-11(小鼠浆细胞瘤)5×106cells/瓶×2N-苄氧羰基-L-谷氨酰胺质量规格:>98%,BRZ-Gln-OH
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人细胞裂解液 (阳性对照) N-CBZ-L-丙氨酸质量规格:>98%,BRCBZ-L-Gly
EFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)3,3'-Dinitrobenzophenone
BE(2)-M17(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;PA3172,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)2,4'-Difluorobenzophenone
人成纤维细胞HCF4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)4,4'-Difluorobenzophenone
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4-二苄氧基苯(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)1,4-Dibenzoylbenzene
大鼠肠内皮细胞完全培养基 100mL3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))质量规格:>97.0%(HPLC)(T)3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride
特点优势:
1. 特异性:三日PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。