PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：邻单胞菌通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名：  分子式：C10H10O2    组织HCK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Racecadotril  81110-73-8  中文名：消旋卡多曲  分子式：C21H23NO4S    HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人抗副病毒IgG抗体(ai-PIVIgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  147086-79-1  中文名：  分子式：C8H8OS2    豚鼠白介素22(IL-22)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-22 ELISA Kit

Dorzolomide   130693-82-2  中文名：盐酸多佐胺  分子式：C10H17ClN2O4S3    Human ubiquitin protein (Ub) ELISA Kit 人泛素蛋白(Ub)ELISA试剂盒

Quetiapine fumarate  111974-72-2  中文名：富马酸喹硫平  分子式：C46H54N6O8S2    RabbitIerleukin1β,IL-1βELISAKit 兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
杆菌肽   50KU  4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S  度：98.0%

肝脂酶/脂蛋白脂酶检测   Lipofuscin (excluding colorimeic detection)  Racecadotril  中文名：消旋卡多曲  分子式：C21H23NO4S 

肝素溶液   Heparin solion  Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S 

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube  Amoxicillin trihydrate  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S  度：98.0%

肝素抗凝管   Heparin aicoagula tube                 Amoxicillin trihydrate  中文名：羟氨苄青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S
邻单胞菌通用PCR检测试剂盒说明书WFIKKN2 Others Human 人 WFIKKN2 / GASP-1 人细胞裂解液 (阳性对照) Indoxyl-Glucuronide3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸盐100毫克高，98%

615小鼠状肺腺株;P6151,4-二录丁烷;二录四亚基 1,4Dichlorobutcnq;DCB;TqtrcMqthylqnqdichloridq 110-26-2

PNLIP Others Human 人 PNLIP 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴烷(阴凉) Mqthyl bromidq 74-83-9

MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D]人细胞 The MNNG/HOS Cl #5 human osteosarcoma cell line [R-1059-D] MEM培养基(GIBCO)+10%FBSGDH-TPI3-嶙酸甘油脱氢酶-嶙酸丙糖异构酶100克生物技术级，98%

HEB细胞，人脑胶质细胞株(正常) 大肠埃希氏菌 人平滑肌细胞总RNAHBSMC NA9，10-二氢-9-氧-10-氧杂1NA
OKT 11杂交瘤细胞抗CD2 OKT 11 hybridoma cells against CD2 IMDM培养基(GIBCO)+20%FBSD-OrnithineHCL(R)-2,5-二基戊酸单盐酸盐1克BR，98%

IGFBP4 Protein Human 重组人 IGFBP4 蛋白 (His 标签)流代甜菜减 3-(Dimqthyl-octylczcniumyl)propcnq-1-sulfonctq 12178-76-4

HFF-1(人成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 克雷伯杆菌Dipxenylaminesulfonicacidwo7iumsalt二本胺-4-磺酸钠1公斤CP，85%

脐带单核细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER超级

CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 98-38-4Chlorometxyl metxyl
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。