PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：中华根瘤菌通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

6-Hydroxyrubiadin  中文名：6-羟基甲基异茜草素  分子式：C15H10O5    Acetaldehydeoxime

6-Fluoro-3-(4-piperidinyl)-1,2-benzisoxazole   中文名：  分子式：C12H14ClFN2O    乙酰胺   100g

6-Deoxy-3-O-methyl-β-allopyranosyl(1→4)-β-cymaronic acid δ-lactone  中文名：  分子式：C14H24O8    Acetamide                 

6-Chloroguanine riboside  中文名：6-氯鸟嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4    乙脱氢酶（ALDH）试剂盒   紫外分光光度法   50管/48样

6-Benzyloxypurine  中文名：6-苄氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O    辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒   可见分光光度法   50管/24样
兔热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  5-Aminoindole  5192-03-0  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔热休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2  度：98.0%

兔去甲上腺素elisa试剂盒   兔去甲上腺素试剂盒   规格型号：96T/48T   兔去甲上腺素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔去甲上腺素试剂盒、兔去甲上腺素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  5-Aminoindazole  19335-11-6  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3  度：98.0%   

兔去甲上腺素(NA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           5-Aminoindazole  中文名：5-氨基吲唑  分子式：C7H7N3 

兔去甲上腺素(NA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  中文名：4-苯甲酰基-3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式：C17H14N2O2  度：98.0%
中华根瘤菌通用PCR检测试剂盒直销NCI-H1299(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H1N1 (A/USSR/90/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲基罗格列酮-d4质量规格：美国进口N-Desmethyl Rosiglitazone-d4

原代心肌细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100ml罗格列酮（钾盐）质量规格：美国进口Rosiglitazone (potassium salt)

EDAR Others Rat 大鼠 EDAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 罗格列酮盐酸盐质量规格：美国进口rosiglitazone hydrochloride

大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL5-羟基罗格列酮质量规格：美国进口5-Hydroxy Rosiglitazone

HaCaT人永生化表皮细胞 HaCaT immortalized human epidermal cells DMEM+10% FBS去甲异波尔定（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Norisoboldine
TLR2 Others Rat 大鼠 TLR2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GENEPAGE6%EZSQUEEZE*CLDPAK*6% GENE-PAGE, 挤压式瓶装生物技术级10X75MLCOLD

HK-2, 人肾皮质近曲小管上皮细胞氧基三本基录化鏻 (Mqthoxymqthyl)triphqnylphosphonium chloridq 4009-98-7

RN-s, 大鼠纹状体神经元 [X464-20C]细胞 Vero(非洲绿猴肾细胞)左卡泥汀相关物质A Lqvoccrnitinq Rqlctqd CoMpound c;3-ccrboxy-N,N,N-triMqthyl-2-propqn-1-cMiniuM chloridq 6238/8/2

人十二脂肠腺癌;HuTu-80抑肽酶(牛肺)shēng huà shì jì容量：RT25克

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) N-芴甲氧羰酰基-L-亮酸NA
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。