产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP4253 |
用途范围 | 公司产品仅用物科研 |
纯度 | % |
规格 | 50次 |
是否进口 | 是 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
单胞菌通用PCR检测试剂盒直销 | Pseudomonas spp.PCR | BKP4253 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
特点优势:
1. 特异性:单胞菌通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0% 豚鼠肝细胞生长因子elisa试剂盒 豚鼠肝细胞生长因子试剂盒 规格型号:96T/48T 豚鼠肝细胞生长因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:豚鼠肝细胞生长因子试剂盒、豚鼠肝细胞生长因子eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
Repaglinide 中文名:瑞格列奈 分子式:Repaglinide 度:98.0% 兔子脱氢表雄酯elisa试剂盒 兔子脱氢表雄酯试剂盒 规格型号:96T/48T 兔子脱氢表雄酯试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔子脱氢表雄酯试剂盒、兔子脱氢表雄酯eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。
3-Amino-2,6ione 中文名: 分子式:C5H9ClN2O2 度:98.0% 细胞毒 T 细胞相关抗原 4(CTLA-4) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0% 结缔组织生长因子 (CTGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
Ezetimibe 中文名:依泽替米贝 分子式:C24H21F2NO3 度:98.0% 心肌营养素 -1(CT-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
人维生素D(VD)ELISAKit ELISA. 96T/48T 中文名: 分子式:C29H39N5O8
人脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISAKit ELISA. 96T/48T 2-Benzothiazolol 中文名:2-羟基苯并噻唑 分子式:C7H5NOS
人突触足蛋白(SYNPO)酶联吸附测定试剂盒 Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit 2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate 中文名: 分子式:C19H14F2O6
人铁蛋白(FE)酶联吸附测定试剂盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit 3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19
人特异性抗原(TSA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol 中文名: 分子式:C19H16FNO
单胞菌通用PCR检测试剂盒直销SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-羟基-4-甲氧基肉桂酸质量规格:美国进口3-Hydroxy-4-methoxycinnamic
CL-0047C6(大鼠细胞)5×106cells/瓶×2吡嗪酰胺-d3质量规格:美国进口Pyrazinamide-d3
CSAG1 Others Human 人 CSAGE / CSAG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 地美环素质量规格:美国进口Demeclocycline
小鼠肠微细胞完全培养基 100mL盐酸地美环素半水化合物质量规格:美国进口
293LVT人胚肾细胞--用于慢病毒包装 293LVT human embryonic kidney cells -- for leiviral packaging DMEM(GIBCO:11995)+10% FBS(GIBCO)+1%NEAA+200mM L-glutamine乙基2-(6-氨基-2,3-)甘氨酸(阿那格雷杂质A)质量规格:美国进口Ethyl 2-(6-Amino-2,3-dichlorobenzyl)glycine(Anagrelide Impurity A)
人脐内皮细胞;HUV-EC-C邻硝基本-α-D-葡萄糖苷shēng huà shì jì容量:100克
CMA1 Others Human 人 CMA1 / Chymase 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,4,6-三基本安 2,4,6-Trimqthylcnilinq 1988-2-1
草鱼肾细胞;GIK锌shēng huà shì jì容量:RT5克
T24细胞,膀胱移行细胞癌细胞 子宫高分化鳞癌细胞,HCC细胞 EB病毒转化的人B细胞;KMY0908碱式碳酸锌shēng huà shì jì容量:50毫升
615小鼠滑膜瘤株;ZM75566-99-92-2-Naphthaldehyde
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。