免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-PCNA-Proliferation Marker
中文名称  增殖细胞核抗原抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, Guinea Pig 
产品类型     一抗
别    名  Cyclin; DNA polymerase delta auxiliary protein; HGCN8729; MGC8367; Mutagen-sensitive 209 protein; Pcna/cyclin; PCNAR; Polymerase delta accessory protein; Proliferating Cell Nuclear Antigen; PCNA_HUMAN.
研究领域    细胞生物 免疫学 染色质和核信号 细胞周期蛋白 转录调节因子 细胞类型标志物
蛋白分子量   predicted molecular weight: 29kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human PCNA C-terminus
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备过程：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
EPHA3 Others Human 人 EphA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀二聚体杂质Simvastatin Dimer Impurity质量规格：美国进口

脐内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)辛伐他汀，1-芘乙酰酯Simvastatin, 1-Pyreneacetyl Ester质量规格：美国进口

JK(Jurkat)细胞，人细胞瘤细胞 615小鼠网织细胞性瘤株,L615细胞 人平滑肌细胞裂解物HCSMCL2,3-脱氢辛伐他汀酸钠盐2,3-Dehydro Simvastatin Acid  Salt质量规格：美国进口

NCI-H2227(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2脱氢辛伐他汀Dehydro Simvastatin质量规格：美国进口

Calu-3(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0062CHO-K1(仓鼠卵巢细胞亚株)5×106cells/瓶×2 正常小鼠Leydig细胞;TM36'-羧基辛伐他汀6'-Carboxy Simvastatin质量规格：美国进口
FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺嘧啶Sulfadiazine质量规格：美国进口

INS-1 大鼠细胞N-乙酰基磺胺嘧啶N-Acetyl Sulfadiazine质量规格：美国进口

中国仓鼠卵巢细胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF5'-羟基苯卡维地洛5'-Hydroxyphenyl Carvedilol质量规格：美国进口

LncaP, 人细胞O-去甲卡维地洛O-Desmethyl Carvedilol质量规格：美国进口

人急性T细胞细胞;Jurkat, Clone E6-1 大鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL4'-羟苯基卡维地洛4'-Hydroxyphenyl Carvedilol质量规格：美国进口
RK1 Others Mouse 小鼠 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 左旋肉碱；维生素BT；左卡尼汀质量规格：>98%,BRL(-)-Carnitine

人心肌细胞cDNAHCM cDNA左卡尼汀;左旋肉碱（标准品）质量规格：HPLC含量测定Levocarnitine;L(-)-Carnitine

MX-1细胞，人癌细胞 猪肾细胞系,PK-15细胞 大隐平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)L-谷氨酸钠，一水质量规格：>99%L-Glutamic acid mono salt hydrate

VE(人内皮细胞) 5×106cells/瓶×2DL-赖氨酸盐酸盐质量规格：>98%,BRDL-Lysine·HCl

HUtMEC Pellet 人子宫微内皮细胞团块 > 1 mio.cells 肌细胞分离液MDSDL-正缬氨酸质量规格：>98%,BRDL-Norvaline
增殖细胞核抗原抗体 中国仓鼠肺细胞;CHL[Phe2,Orn8]-催产素质量规格：>95%,BR[Phe2,Orn8]-Oxytocin

BxPC-3细胞，人原位胰腺腺癌细胞 人皮肤纤维微细胞系,Malmc细胞 小鼠浆细胞瘤;MPC-11[Ser4,Ile8]-催产素质量规格：>95%,BR[Ser4,Ile8]-Oxytocin

HT-1080(人纤维细胞) 5×106cells/瓶×2[Tyr34]-甲状旁腺激素(7-34) 酰胺 (牛)质量规格：>95%,BR[Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)

Gibco 17104019 Collagenase Type IV 1g[Trp4]-Kemptide质量规格：>95%,BR[Trp4]-Kemptide

人髓核细胞裂解物HNPCL（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Coumarin

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