免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-phospho-ROCK1(Thr455/Ser456)
中文名称  磷酸化Rho相关蛋白激酶1抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit 
产品类型     一抗 磷酸化抗体
别    名  p-ROCK1(Thr455/Ser456); p160 ROCK1; p160ROCK; Renal carcinoma antigen NY REN 35; Rho associated coiled coil containing protein kinase 1; Rho associated protein kinase 1; Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 1; ROCK1_HUMAN.
研究领域    信号转导 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 158kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ROCK1 around the phosphorylation site of Thr455/Ser456
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备过程：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
小耳猪肺细胞;SEP-L1女贞苷（标准品）Ligustroflavone质量规格：HPLC≥98%，标准品

A-427细胞，人细胞 小鼠成纤维细胞,L929细胞 CM-R103大鼠脑平滑肌细胞完全培养基100mL夏佛塔苷（标准品）Schaftoside质量规格：HPLC≥98%，标准品

RM-1(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2二氢小檗碱（标准品）9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob质量规格：HPLC≥98%，标准品

Gibco 10486025 EXPRESS FIVE SFM..昆虫培养基 1000ml桔红素;桔皮素(标准品)Tangeretin质量规格：HPLC≥98%，标准品

人上皮细胞cDNAHBEpiC cDNA桔红素;桔皮素Tangeretin质量规格：HPLC≥98%,BR
人子宫内膜腺癌细胞;HEC-1-B2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亚苯(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene质量规格：>98.0%(HPLC)

SiHa细胞，子细胞 人母系细胞,CNE-2Z细胞 CL-0240V79(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亚苯(>98.0%(T))2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene质量规格：>98.0%(T)

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-p71-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))1-Bromo-4-n-octylbenzene质量规格：>90.0%(GC)

FIGF Others Human 人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))1-Bromo-4-decylbenzene质量规格：>88.0%(GC)

肺平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))1-Bromo-4-dodecylbenzene质量规格：>90.0%(GC)
LYVE1 Others Mouse 小鼠 LYVE1 / LYVE-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒马曲坦-d6琥珀酸盐质量规格：美国进口Sumatriptan-d6 Succinate

大鼠肺大平滑肌细胞完全培养基 100mL双氯芬酸甲酯质量规格：美国进口Diclofenac Methyl Ester

FRhK-4细胞，恒河猴胚肾细胞 EB-3 [EB3](人样Butt瘤细胞) CM-H026人内皮细胞完全培养基100mL双氯芬酸酰胺质量规格：美国进口Diclofenac Amide

BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白芴甲氧羰基-加巴喷丁质量规格：美国进口Fmoc-Gabapentin

MKN45(人细胞) 5×106cells/瓶×2 皮下脂肪细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)舒巴坦酸(标准品)质量规格：≥98%,标准品Sulbactam Acid
磷酸化Rho相关蛋白激酶1抗体说明书U-2 OS细胞，细胞 人二倍体细胞系,KMB-17细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3胶原酶shēng huà shì jì容量：25克

小鼠T瘤细胞(鸡OVA基因修饰);E.G7-OVA2,3-环氧炳基-4-氧基本基迷 2,3-qPOXYPROPYL-4-MqTHOXYPHqNYL qtqr 11-94-1

FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 透析袋3500shēng huà shì jì容量：1000u

人脉络丛成纤维细胞HCPF癸二酸二丁酯shēng huà shì jì容量：500毫克

FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-脱氧鸟苷-5-1酸钠盐(+4℃)NA

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