免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-RING5
中文名称  环指蛋白5抗体（E3泛素蛋白连接酶RNF5）
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse 
产品类型     一抗
别    名  E3 ubiquitin protein ligase RNF5; G16; HsRma1; NG2; OTTHUMP00000029107; Protein G16; Ring finger; protein 5; RING5; RMA1; RNF 5; RNF5_HUMAN.
研究领域    细胞生物 细胞生物标志物
蛋白分子量   predicted molecular weight: 20kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RING5 (51-100aa)
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备过程：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
草鱼肾细胞;GIK柠檬苦素，黄柏内酯(橙皮提取) Limonin质量规格：HPLC≥98%,橙皮提取

615小鼠滑膜瘤株;ZM755 小鼠膀胱平滑肌细胞完全培养基 100mL硬脂酸(50%)Stearic acid质量规格：含量50%，药用级

mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞 Mouse硬脂酸(98%)Stearic acid质量规格：含量98%,药用级

EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 人细胞裂解液 (阳性对照) 牛蒡苷元(标准品)Arctigenin质量规格：HPLC≥98%，标准品

人正常上皮细胞;MCF 10A牛蒡子苷（标准品）Arctiin质量规格：HPLC≥98%，标准品
人细胞;SMMC-7721固K盐Fast Black K Salt质量规格：>80%,BR

MG-63细胞，细胞 人细胞,CNE细胞 CL-0248ZR-75-30(人癌细胞)5×106cells/瓶×2氨基10BAmido black 10B质量规格：AR

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS21-癸烷磺酸钠[离子对色谱级]IPC-ALKS-10质量规格：离子对色谱用试剂

VEGFC Others Human 人 VEGF-C 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-十一烷基磺酸钠[离子对色谱级]IPC-ALKS-11质量规格：离子对色谱用试剂

肺动脉成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1-十二烷基磺酸钠[离子对色谱级]IPC-ALKS-12质量规格：离子对色谱用试剂
LLC-MK2 恒河猴肾细胞钯粉(>99%,BR)质量规格：>99%,BRPalladium, powder

CM-H027人成纤维细胞完全培养基100mL乙酸副品红(>85%,BS)质量规格：>85%,BSPararosaniline acetate

SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐药细胞株钙激活钾通道阻断剂来源于覃青霉质量规格：>98%,BC Paxilline*, from Penicillium paxilli

人细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 大鼠肺平滑肌细胞完全培养基 100mL青霉酸(>98% (HPLC),BC)质量规格：>98% (HPLC),BCPenicillic acid

子宫内膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硝酸奥昔康唑（标准品）质量规格：HPLC法含量测定Oxiconazole Nitrate
环指蛋白5抗体（E3泛素蛋白连接酶RNF5）规格人细胞;AsPC-1甲基-α-D-半乳糖苷100克

VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人细胞裂解液 (阳性对照) 流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6

人胚肺二倍体细胞;KMB-17IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑层析缓冲液蛋白组学级100MLCOLD

AGT Others Mouse 小鼠 AGT / SerpinA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 三乙酸100毫克保存：-20℃

NCI-H1975 人(化啶)

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