免疫荧光技术的实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-VGF/NERP1
中文名称  神经调节肽VGF抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Cow, Guinea Pig, Danio rerio 
产品类型     一抗
别    名  NERP-1; Nerve growth factor inducible; Neuroendocrine regulatory peptide-1; Neurosecretory protein VGF; VGF; VGF_HUMAN.
研究领域   细胞生物 神经生物学 生长因子和激素
蛋白分子量   predicted molecular weight: 65kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human NERP1
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM , Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备过程：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：
（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
3T6-Swiss albino细胞，胚胎成纤维细胞 人细胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞 CM-M040小鼠肝窦内皮细胞完全培养基100mL丁胺卡那霉素无水Amikacin质量规格：效价：>900 u/mg

正常大鼠肾细胞;NRK氨茶碱(>98%,BR)Aminophyllin hydrate质量规格：>98%,BR

CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人细胞裂解液 (阳性对照) 柠檬酸铋铵Ammonium bismuth , hydrate质量规格：BR

人脉络丛成纤维细胞cDNAHCPF cDNA溴化铵(>99%,BR)Ammonium bromide质量规格：>99%,BR

KLK7 Others Mouse 小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 人细胞裂解液 (阳性对照) 化铵(>99%,BR)Ammonium iodide质量规格：>99%,BR
CD14 Others Human 人 CD14 人细胞裂解液 (阳性对照) Cupricoxide氧化铜250克AR，99%

小鼠小肠内皮细胞完全培养基 100mL流醋亚铈 CqRIUM TITcNIUM FLUORIDq 10420-29-6

Pig MSC猪骨髓间质干细胞 Pig MSC of porcine bone marrow mesenchymal stem cells DMEM低糖+10% FBS+glutamin1000ul盒装无菌带滤芯吸头shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500U

IL6 Protein Rat 重组大鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白L-TYROSINEL-酪酸美国药典级500G60-18-4RT

RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12未分化(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤)(ABA)
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 三(2-氯乙基)1酸酯(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)Tris(2-chloroethyl) Phosphate

人肾小管上皮细胞;HKC1酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate

NCI-H345细胞，人小细胞细胞 小鼠脑神经瘤细胞,Neuro-2a细胞 CM-H119人脑膜细胞完全培养基100mL1酸三(2-正丁氧乙基)酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Tris(2-butoxyethyl) Phosphate

PA317(小鼠成纤维细胞) 5×106cells/瓶×21酸2-乙基己基二苯酯(>90.0%(GC))质量规格：>90.0%(GC)2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate

Promocell C-27439 Adipocyte Nuition Medium KIT, 脂肪细胞营养培养基套装 500ml1酸二氢锰(>98%,BR)质量规格：>98%,BRManganese (II) phosphate monobasic tetrahydrate
神经调节肽VGF抗体直销HepG2.2.1.5细胞，人细胞 人星形细胞,U251细胞 大鼠肾系膜细胞;RMC二本-4-磺酸钠，英文名或英文缩写：Dipxenylaminesulfonic acid wo7ium salt，级别：CP，85%，规格：1公斤

K-562(人细胞) 5×106cells/瓶×2头孢妥仑匹酯 Cqfditorqn Pivoxil 117467-8-4

Promocell C-25120 Hepatocyte Maienance MediumKIT, 肝细胞维持培养液套装 500mlBIO-BLOCKINTBSBIO-BLOCK膜阻断试剂(于1XTBS)生物技术级无色混浊液体COLDsigma

人肝细胞;QSG-7701 [QSG7701]偶氮二异戊，英文名或英文缩写：VAZO67，级别：CP，98%，规格：500毫克

EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) ADP,2Na,2H2O 100mg/250mg/1g Sigma分装

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