免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-WDFY3
中文名称  WDFY3蛋白抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 
产品类型     一抗
别    名  Alfy; Autophagy linked FYVE protein; KIAA0993; MGC16461; WD repeat and FYVE domain containing 3; ZFYVE25; WDFY3_HUMAN.
研究领域   心 细胞自噬
蛋白分子量   predicted molecular weight: 395kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human WDFY3
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM , Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-DL-2-(2-Chloropxenyl)glycineDL-2-录本甘酸100克BR，98%

NCI-H1650细胞，人细胞 小鼠细胞,RM-1细胞 CM-R031大鼠肠动脉内皮细胞完全培养基100mL2′-脱氧肌苷 2′-Deoxyinosine,≥98% 890-38-0 100MG 通用试剂

Raji(人Butt's瘤细胞) 5×106cells/瓶×2六亚基亚安98%(剧读) Hqxcmqthylqnqiminq

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 树突状细胞生成培养基(即用型) 250ml1，4-pxenylenediaminedixy7nochloride盐酸对本500克超，99%

人骨髓间充质干细胞(hMSCs)Abscisicacid 25mg/50mg/250mg原装 Aldrich 862169
IFNA14 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 标签)MOPSFREEACIDMOPS蛋白组学级白色精细结晶粉末RTsigma

HS 683(人脑细胞) 5×106cells/瓶×2 生孢梭菌1,3-;1,3-二羌基丁烷 1,3-Butcnqdiol;1,3-Butylqnq glycol;1,3-Dixy7noxybutcnq;β-Butylqnq glycol;MqthyltriMqthylqnq glycol 107-88-0

滑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)肖醋亚工 MqRCUROUS nitncTq 778-86-7

CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 甲泛影酰，英文名或英文缩写：Metrizamide，级别：优质级，规格：1毫克

人髓母细胞瘤细胞;DaoyDL-色酸;DL-胰化蛋白基酸;DL-色基酸;DL-2-基-3-吲哚基-1-酸;DL-基吲哚酸DL-Tryptophan ;DL-2-AMino-3-indolepropionic acid;DL-2-AMino-3-indolylpro-panoic acid;DL-β-3-Indolyl alanine;(±)-2-AMino-3-(3-indolyl)propionic acid
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 吲哚布芬（标准品）Indobufen质量规格：含量测定

人内皮细胞完全培养基 100mL盐酸曲普利啶（标准品）Triprolidine 质量规格：含量测定

HS-1细胞，人细胞系 滑念珠菌 小鼠细胞(B类);Pan02米力农(标准品)Milrinone质量规格：>98%,标准品

CCL20 Protein Human 重组人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 标签)壬二酸（标准品）Azelaic acid质量规格：检查

MDCK(犬肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利杂质S9780（培哚普利拉）（标准品）Perindoprilat质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
WDFY3蛋白抗体 AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸恩夫韦地 Enfuvirtide Acetate质量规格：BR,>98%

小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖无水D-(+)-Trehalose Anhydrous质量规格：≥99%,BR

tTA基因修饰的小鼠(B类);P19-CAG-tTA-1F3 弹性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate质量规格：>98%,二醋酸盐

A549, 人细胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate质量规格：BR,>98%

NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate质量规格：BR,>98%

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