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免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-ZNF474/ZFP106
中文名称  锌指蛋白474抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse 
产品类型     一抗
别    名  zinc finger protein; ZFP106; DKFZp451A239; FLJ34610; FLJ45841; SH3 domain binding protein 3; SH3BP3; Zfp 106; Zinc finger protein 106 homolog (mouse); Zinc finger protein 106 homolog; Zinc finger protein 474; ZNF474.
研究领域   细胞生物 染色质和核信号 转录调节因子 锌指蛋白
蛋白分子量   predicted molecular weight: 207kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNF474 C-terminus
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在 上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白，再经透析法将其纯化。
IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白钙盐，英文名或英文缩写：Calcium propionate，级别：3.5N，250-300目，规格：1克

HKC(人胚肾上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 小肠耶尔森氏菌6-录-1- 97% 6-Chlorohqxcnol 009-83-8

内皮细胞生长添加物ECGS水合醋酸镧，英文名或英文缩写：Lanthanum acetate hydrate，级别：3N，规格：1克

CLEC12A Others Human 人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 焦嶙酸钾25克

CSSTSP1 中华鳖脾来源细胞(猩红S)
SCGB1A1 Others Mouse 小鼠 SCGB1A1 / uteroglobin 人细胞裂解液 (阳性对照) Farnesol法呢醇500克AR，98%

KYSE150 食管鳞癌雷公藤春碱 Wilfortrine (HPLC,≥98%) 37239-48-8 10MG 标准品

ME-180人子宫颈表皮癌细胞 ME-180 human cervical epidermoid carcinoma cells McCOY's 5A+10%FBS5-拂胞嘧啶 Flucytosinq;2-xy7noxy-4-cMino-5-fluoropyriMidinq;clcobon;cncobon;cncotil;5-FC,RO 2-9915 0-82-7

HGF Protein Rat 重组大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白酚，英文名或英文缩写：pxenolphthalein，级别：BR，95%，规格：10克

小鼠海马趾星形胶质细胞(MA-h)(5×105) kasumi-1, 人细胞株 Human10108-87-9癸基基录化铵Decyltrimetxylammonium chloride
NOV Protein Canine 重组狗 CCN3 / NOV 蛋白 (His 标签)人参皂苷Rh3(标准品)Ginsenoside Rh3质量规格：HPLC≥98%，标准品

G1(发绿色荧光的小鼠胚胎干细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠小胶质细胞RM人参皂苷Ro（标准品）Ginsenoside Ro质量规格：HPLC≥98%，标准品

心肌细胞培养基CMM-prf肉豆蔻木脂素(标准品)Myrislignan质量规格：HPLC≥98%，标准品

MDK Others Human 人 Midkine / MDK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 肉桂醇（标准品）Cinnamyl alcohol质量规格：HPLC≥98%，标准品

EB病毒转化的人B细胞(傣族);KM9405肉桂醛(标准品)Cinnamaldehyde质量规格：GC≥99%，标准品
锌指蛋白474抗体 TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白物质P（1-7）Substance P (1-7)质量规格：>95%,BR

人结膜纤维原细胞(HConF)(5×105 ) HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 HumanSB 203580SB203580质量规格：>98%,p38 MAPK抑制剂

人导管癌细胞;ZR-75-306-氨基-3-甲基嘌呤(3MA)；细胞自噬抑制剂3-MA;6-Amino-3-methylpurine质量规格：HPLC≥97%,autophagy inhibitor

ENPEP Others Rat 大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A (aa 41-945) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) ；2,6-二羟基嘌呤；2,6-Dihydroxypurine；Xanthine质量规格：>99%,BR

C2C12, 小鼠肌原细胞Necrostatin1Necrostatin-1质量规格：>98%,RIP1抑制剂

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