注意事项：

该细胞只可用于科研。出现以下情况不予以重发：客户造成细胞污染；客户不正确操作致细胞状态不好；细胞状态不好，未提供细胞培养前3天照片；细胞培养时经其它处理；细胞收到2天内，未告知相关情况。

产品名称 大鼠视网膜色素上皮细胞
组织来源 视网膜组织
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮采用yi蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠视网膜色素上皮经PCK免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息 
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

细胞操作步骤:

传代步骤：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1 - 2次。
加2ml消化液（0.25% Trypsin - 0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1 - 2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
按6 - 8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1 - 2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
复苏步骤：
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1 - 2mL培养基后吹匀。换液并检查细胞密度。
冻存步骤：
以T25瓶为例：
细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1 - 2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
1000RPM离心5分钟去掉上清，用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中，放入 - 80℃冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存，记录冻存管位置以便下次拿取。

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