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BJ5183-AD-1 电击感受态细胞
物品单位 价格 品牌
1250 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-G63246
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2021-02-21
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 BK-G63246
组织来源 详见说明书
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
规格 50ul*5 50ul*50
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 产品仅用于科研
生长状态 详见说明书
物种来源 详见说明书
纯度 %
是否进口
规格参数:

产品名称:BJ5183-AD-1 电击感受态细胞
规格 :50ul*5 50ul*50
分类:克隆感受态细胞
用途:生化试剂(用于科研试验研究)
储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位: 袋

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注意事项:

1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。
操作方法:
1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

转染试剂(溶液)质量规格:>95%,分子生物学级Transfection Reagents-Biofection  大鼠细胞因子ELISA检测试剂盒RatlymphocytefactorELISAKit 96T/48T  石蜡切片结缔组织(CONNECTIVETISSUE)马森(MASSON)染色试剂盒50

反式肉桂醛(>95%BR)质量规格:>95%BRtrans-Cinnamaldehyde  c-sis 试剂盒 Human c-sis ELISA Kit  ELISAKitTn-Ⅰ人肌钙蛋白规格:48T/96T

富勒烯 C60(),球 C60质量规格:>99.5%(HPLC)Fullerene C60 (pure)  英文名称MouseU-TSHELISAKit小鼠高灵敏度激素(U-TSH)规格:96T/48T  大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1(>45%BR)质量规格:>45%BRPyrophosphoric acid  冰冻切片组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(AP二抗)20  人胃泌素(Gasin)试剂盒 Human Gasin ELISA Kit

犬胰蛋白酶(ypsin)试剂盒 Canine ypsin ELISA Kit  18607-90-4卡枯醇说明书  kakoul  

英文名称MouseSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit小鼠5-羟色氨(5-HT)规格:96T/48T  58-55-9茶碱品牌  Theophylline

差异相减杂交试剂盒10  34271-54-0茶氨酸规格  Theanine

Ratfreefattyacids,FFAELISA试剂盒大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒规格:96T/48T  30462-34-1茶黄素-3-没食子酸酯厂家  Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G)  

小鼠组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)ELISA试剂盒 ,英文名: HDAC4 ELISA Kit  28543-07-9茶黄素-3#146;-没食子酸酯说明书  Theaflavin-3#146;-Gallate  (TF-3#146;-G)

83-86-3植酸品牌   Phytic acid  组织HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20

83-67-0可可碱品牌  Theobromine  组织FGFR1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

83-49-8猪去氧胆酸厂家   Hyodeoxycholic acid  组织EPHA3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

83-48-7豆甾醇品牌  Stigmasterol   组织EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性检测试剂盒20

BJ5183-AD-1 电击感受态细胞83-46-5β-谷甾醇说明书  β-Sitosterol   组织D-乳酸比色法定量检测试剂盒20