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S17-1 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
1250 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-G63259
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2021-02-21
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 BK-G63259
组织来源 详见说明书
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
规格 100ul*10 100ul*50
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 产品仅用于科研
生长状态 详见说明书
物种来源 详见说明书
纯度 %
是否进口

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数:

产品名称:S17-1 感受态细胞
规格 :100ul*10 100ul*50
分类:克隆感受态细胞
用途:生化试剂(用于科研试验研究)
储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项:


1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

仲辛醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Octanol质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)  人抗型肝炎病毒抗体(ai-HCV)试剂盒 Human ai-hepatitis C virus(HCV)aibody ELISA Kit  人紧张素转化酶(ACEⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

二十八烷(standard for GC,≥98.5%(GC))Octacosane质量规格:standard for GC,≥98.5%(GC)  rabbitTissuefactor,TFELISAKit兔子组织因子(TF)ELISA试剂盒规格:96T/48T  猪神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)试剂盒 Pig glial fibrillary acidic protein,GFAP ELISA Kit

草酸(Standard for GC,≥99.6%)Oxalic acid dihydrate质量规格:Standard for GC,≥99.6%  载玻片细胞CYP1A2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  HumanN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

正十五烷(标准品)N-PENTADECANE质量规格:内标  Humanβcatenin,β-CatELISA试剂盒人β连环蛋白/联蛋白(β-Cat)ELISA试剂盒规格:96T/48T  HumanmammarycarcinomaMarker-CA153ELISA试剂盒人癌标志物-CA153ELISA试剂盒规格:96T/48T

猫细小病毒抗体(FPV)ELISA检测试剂盒Felisparvovirus,FPVELISAKit 96T/48T  539-86-6大蒜素品牌  Allicin

犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)试剂盒 Canine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit  55481-88-4大叶茜草素规格  Rubimaillin

英文名称MouseAILR3ELISAKIT小鼠AILR3规格:96T/48T  122021-74-3丹参酚酸B甲酯厂家  Monomethyl lithospermate B  

肠胃活检螺旋杆菌(H.PYLORI)吉姆萨(GIEMSA)染色试剂盒50  22681-72-7丹参素说明书  Danshensu

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格:96T/48T  67920-52-9丹参素钠品牌   Danshensu

74285-86-2雷酚内酯品牌  Triptophenolide    组织1酸二酯酶2(PDE2)活性荧光定量检测试剂盒10

74285-86-2雷酚内酯品牌  Triptophenolide   组织1酸二酯酶2(PDE2)活性酶连续循环光谱法定量检测试剂盒10

73-31-4褪黑素说明书  Melatonin  组织1酸二酯酶1(PDE1)活性荧光定量检测试剂盒10

73069-14-4白术内酯品牌  2-Atractylenolide   组化染色操作20样本

73-03-0虫草素说明书  cordycepin   组分氧化应激活性氧(ROS)鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒50

S17-1 感受态细胞操作方法:

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。