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铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌 PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)
物品单位 价格 品牌
3800 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P63994
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2022-09-22
产品详细说明
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P63994
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 %
CAS编号
规格 50T
是否进口

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

铜绿假单孢菌(PA/绿脓杆菌  PCR检测试剂盒(荧光-PCR)

50T

BK-P63994

实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸0(NADPH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Emodin  518-82-1  中文名:大黄素  分子式:C15H10O5  度:99.0%  关键词:  抗菌; ; 导泻; 酸模属; 大黄属; 决明属; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠牙本质涎0蛋白   英文名称:   Mouse Dein Sialophosphoprotein   规格:   48T/96T   英文缩写:   DSP  Myricadenin A  中文名:  分子式:C39H40O17  度:97.5%

小鼠血小板源生长因子-BB(mouse PDGF-BB)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Mefenamic acid  61-68-7  中文名:甲灭酸  分子式:C15H15NO2  度:98.0%  关键词: 

小鼠血小板源生长因子-BB   英文名称:   plateler-derived growth factor BB   规格:   48T/96T   英文缩写:   PDGF-BB  m-Nitrohydrocinnamic acid  1664-57-9  中文名:  分子式:C9H9NO4 

小鼠血小板因子elisa试剂盒   小鼠血小板因子试剂盒   规格型号:96T/48T   小鼠血小板因子试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠血小板因子试剂盒、小鼠血小板因子elisa试剂盒   保存条件:2-8   保质期:6个月。     N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide  42137-88-2  中文名:N,N-(2-氯乙基)对甲苯磺酰胺  分子式:C11H15Cl2NO2S
3T3L1细胞,小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 癌细胞,ER-30细胞 体外管腔形成分析试剂盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene质量规格:>98.0%(GC)

非洲绿猴肾细胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole质量规格:>99.0%(GC)

IL25 Others Human  IL25 细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-去亚异丙基托吡酯4,5-Desisopropylidene Topiramate质量规格:美国进口

滑膜细胞培养基SM-prfR-羟基托吡酯R-Hydroxy Topiramate质量规格:美国进口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) S-羟基托吡酯S-Hydroxy Topiramate质量规格:美国进口
大额牛肺细胞;BFR-L1硝酸奥昔康唑(标准品)Oxiconazole Nitrate质量规格:HPLC法含量测定

Ishikawa, 内膜癌细胞系普瑞巴林(标准品)Pregabalin质量规格:HPLC法含量测定

细胞;SF767 大鼠腮腺细胞完全培养基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸(普瑞巴林杂质)(标准品)[(S)-(+)-MandelicAcid] Pregabalin impurity)质量规格:供检查用

肾系膜细胞生长添加物MCGS山梨醇(标准品)D-Sorbitol质量规格:供检查用

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 细胞裂解液 (阳性对照) 乙二醇(标准品)Ethylene Glycol质量规格:供检查用
20-Hydroxyecdysone  中文名:20-羟基蜕皮甾酮  分子式:C27H44O7    固(ALD   96T/48T

2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate  中文名:  分子式:C11H13F3O5S    基质金属蛋白酶-9MMP-9   96T/48T

2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid  中文名:  分子式:C12H14O3S    基质金属蛋白酶抑制剂-1TIMP-1   96T/48T              

2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile  中文名:  分子式:C13H10ClN3O2    紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称:   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   英文缩写:   AT1R   规格:   48T/96T

2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol  中文名:  分子式:C11H14O5    素‖受体︱型自身抗体   英文名称:    Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   英文缩写:   AT1R-AA   规格:   48T/96T

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
铜绿假单孢菌(PA)/绿脓杆菌  PCR检测试剂盒(荧光-PCR法)主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR