OverExpress C43(DE3) 感受态细胞-上海帛科生物技术有限公司

OverExpress C43(DE3) 感受态细胞

起订量 (瓶)价格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

产地：进口、国产

货号：BK-G63283

发布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-12-10

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产品详请

产地	进口、国产
保存条件	低温冷藏
品牌	帛科
货号	BK-G63283
用途	产品仅用于科研
组织来源	详见说明书
细胞形态	详见说明书
是否是肿瘤细胞	否
CAS编号
保质期	详见说明书
器官来源	详见说明书
免疫类型	详见说明书
品系	详见说明书
生长状态	详见说明书
物种来源	详见说明书
包装规格	100ul10 100ul50
纯度	%
是否进口	是

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数：

产品名称：OverExpress C43(DE3) 感受态细胞
规格：100ul*10 100ul*50
分类：表达感受态细胞
用途：生化试剂（用于科研试验研究）
储存条件: -70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。
外观:（性状）干冰运输，单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项：

1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC))n-Decyl alcohol质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC) 小鼠ELISA试剂盒素B2(TXB2)ELISA试剂盒，英文名： TXB2 ELISA Kit

琥珀(standard for GC,≥99.6%(GC))Diethyl succinate质量规格：standard for GC,≥99.6%(GC) 小鼠前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒，英文名： PK2 ELISA Kit MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISA试剂盒小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

癸二(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Diethyl sebacate质量规格：Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人维生素D2(VD2)ELISA检测试剂盒HumanVitaminD2,VD2ELISAKit 96T/48T ELISAKitS-100小鼠S100蛋白规格：48T/96T

二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))Docosane质量规格：standard for GC,≥99.0%(GC) 大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)试剂盒 Rat Iegrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA检测试剂盒Mousecatecholamine,CAELISAKit 96T/48T 57420-46-9胡麻属苷品牌 Sesamoside

人抗α-胞衬蛋白抗体(IgG)试剂盒 Human ai-alpha-Fodrin aibody IgG ELISA Kit 98243-57-3湖贝甲素规格 Hupehenine

RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAKit兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒规格：96T/48T 535-83-1葫芦巴碱 Trigonelline

载玻片细胞GSK-3BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 1370264-16-6拟人参皂苷-Rh2说明书 3-O-β-D-glucopyranosyl-3β,12β,25-trihydroxyldammar-(E)-20(22)-ene

Humanβ-Lactamaseinhibitors,BLIELISA试剂盒人β内酰胺酶抑制剂(BLI)ELISA试剂盒规格：96T/48T 6199-67-3葫芦素B品牌 Cucurbitacin B

59-30-3叶酸说明书 Folic acid 猪早老素2(PS-2)试剂盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

59219-65-7豯莶苷品牌 Darutoside 猪早老素1(PS-1)试剂盒 Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit

590-46-5盐酸甜菜碱说明书 Betaine 猪载脂蛋白E(Apo-E)试剂盒 Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit

58812-37-6川楝素规格 Toosendanin 猪载脂蛋白B100(apo-B100)试剂盒 Porcine apo-B100 ELISA Kit

58749-23-8甘草查尔酮B规格 Licochalcone B 猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISA检测试剂盒PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

OverExpress C43(DE3) 感受态细胞操作方法：

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。