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M15(pREP4) 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
1250 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-G63291
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2021-02-21
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 BK-G63291
组织来源 详见说明书
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
规格 100ul*10 100ul*50
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 产品仅用于科研
生长状态 详见说明书
物种来源 详见说明书
纯度 %
是否进口

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数:

产品名称:M15(pREP4) 感受态细胞
规格 :100ul*10 100ul*50
分类:表达感受态细胞
用途:生化试剂(用于科研试验研究)
储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项:


1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

粘酸(>98%BC)Mucic acid质量规格:>98%BC  小鼠型前胶原肽(PⅢNP)ELISA检测试剂盒MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T  ELISAKitOH小鼠25羟基维生素D3规格:48T/96T

碲标准溶液(100μg/ml,基体:HCI)Tellurium standard质量规格:100μg/ml,基体:HCI  人衣原体抗体(Cpn-Ab)试剂盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-Ab ELISA Kit  ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKitβ干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格:96T/48T

铥标准溶液(1000μg/mL,基体:10%HCL)Thulium standard质量规格:1000μg/mL,基体:10%HCL  RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T  人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

钒标准溶液(500mg/L,溶剂:水)Vanadium standard质量规格:500mg/L,溶剂:水  COLLAGENII蛋白共沉淀分析试剂盒5  小鼠胆酯转移蛋白(CETP)试剂盒 Mouse cholest erolester ansfer protein,CETP ELISA Kit

Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISA试剂盒人β血小板球蛋白环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T  136849-88-2灰毡毛忍冬皂苷乙品牌  Macranthoidin B

小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-α ELISA Kit  16830-15-2积雪草苷规格  Asiaticoside

小鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA检测试剂盒MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T  464-92-6积雪草酸厂家  Asiatic acid

人抗SSB/La抗体试剂盒 Human ai-SSB/La aibody ELISA Kit  6902-91-6吉马酮说明书  Germacrone

Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T  357-70-0加兰他敏品牌  Galanthamine

557-61-9二十八烷醇说明书  Octacosanol   猪血浆激肽释放酶(KLKB1)试剂盒 Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit

55750-84-0西红花苷II说明书  Crocin II  猪血红蛋白(Hb)试剂盒 Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit

55576-66-4仙鹤草酚B规格  Agrimol B  猪性因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit

555-66-86-姜烯酚厂家  6-Shogaol   猪舒缓激肽(BK)试剂盒 Pig Bradykinin,BK ELISA Kit

55481-88-4大叶茜草素规格  Rubimaillin   猪生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA检测试剂盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

M15(pREP4) 感受态细胞操作方法:

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。