Stable 感受态细胞-上海帛科生物技术有限公司

Stable 感受态细胞

起订量 (瓶)价格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

产地：进口、国产

货号：BK-G63247

发布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-12-10

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产品详请

产地	进口、国产
保存条件	低温冷藏
品牌	帛科
货号	BK-G63247
用途	产品仅用于科研
组织来源	详见说明书
细胞形态	详见说明书
是否是肿瘤细胞	否
CAS编号
保质期	详见说明书
器官来源	详见说明书
免疫类型	详见说明书
品系	详见说明书
生长状态	详见说明书
物种来源	详见说明书
包装规格	100ul10 100ul50
纯度	%
是否进口	是

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数：

产品名称：Stable 感受态细胞
规格：100ul*10 100ul*50
分类：克隆感受态细胞
用途：生化试剂（用于科研试验研究）
储存条件: -70℃保存，必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6个月。
外观:（性状）干冰运输，单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项：

1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞，用含目的片段的T载体质粒转化（阳性对照）能长出密密麻麻的菌落，而用另一种载体和目的片段的连接产物转化，却一个菌都没长出来，重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关，还是连接出了问题？哪个可能性大些？
答：应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照，确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了，还能用来转化质粒吗？
答：如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况，是可以用来转化的，但是由于冻存时间过长，转化效率会有所下降，如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的，如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

蓝VF Patent Blue VF质量规格：Indicator MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA试剂盒小鼠骨保护素配体(OPGL)ELISA试剂盒规格：96T/48T 胸腺五肽(TP-5)ELISA试剂盒，英文名： TP-5 ELISA Kit

酚酞(IND)Phenolphthalein质量规格：IND 小鼠内肽1(EM1)ELISA试剂盒，英文名： EM1 ELISA Kit MousegranzymesA,Gzms-AELISA试剂盒小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

化钾溶液(100g/L)Potassium iodide solution质量规格：100g/L 人蛋白质二硫键异构酶(PDI)ELISA检测试剂盒Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit 96T/48T ELISAKitIGF-1兔子样生长因子1规格：48T/96T

化钾溶液(1/60mol/L(0.1N))Potassium iodide solution质量规格：1/60mol/L(0.1N) 大鼠乙醇脱氢酶(ADH)试剂盒 Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit bullfroggrowthhormone,GHELISAKit牛蛙生长激素(GH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠性因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA检测试剂盒MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T 33377-72-9茶黄素-3,3＆#146;-双没食子酸品牌 Theaflavine-3,3＆#146;-digallate (TFBG)

人抗表皮细胞基底膜抗体(EBMZ)试剂盒 Human epidermal baseme membrane zone,EBMZ ELISA Kit 20736-09-8柴胡皂苷A规格 Saikosaponin A

rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit兔子组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 58558-08-0柴胡皂苷B1 Saikosaponin B1

载玻片细胞DAPKINASE蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20 58316-41-9柴胡皂苷B2说明书 Saikosaponin B2

Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISA试剂盒人β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISA试剂盒规格：96T/48T 柴胡皂苷B品牌 Saikosaponin B

83-44-3去氧胆酸品牌 Deoxycholic acid 组织C-TAK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

83382-71-2白花前胡丙素规格 Praeruptorin C 组织CSF1R激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

82854-37-3松果菊苷 Echinacoside 组织CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性检测试剂盒20

82508-31-4土槿皮乙酸品牌 Pseudolaric Acid B 组织C-MET激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

81907-62-2灵芝酸A Ganoderic acid A 组织C-KIT激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

Stable 感受态细胞操作方法：

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的DNA（质粒或连接产物）并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打)，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰中并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB)，混匀后37℃，200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放37℃培养至少15小时。