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Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞
物品单位 价格 品牌
1250 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-G63287
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2021-02-21
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 BK-G63287
组织来源 详见说明书
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
规格 100ul*10 100ul*50
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 产品仅用于科研
生长状态 详见说明书
物种来源 详见说明书
纯度 %
是否进口

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

规格参数:

产品名称:Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞
规格 :100ul*10 100ul*50
分类:表达感受态细胞
用途:生化试剂(用于科研试验研究)
储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
单位: 袋

注意事项:


1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

长春西汀(标准品)质量规格:含量测定Vinpocetine  英文名称RatCD23ELISAKit大鼠CD23规格:96T/48T  大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 ,英文名: TAP ELISA Kit

枸橼酸铋雷尼替丁(标准品)质量规格:供检查用Ranitidine bismuth   可溶性植物叶绿体总蛋白制备试剂盒20  人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA检测试剂盒HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISAKit 96T/48T

丹曲林钠(标准品)质量规格:含量测定Dantrolene  hemiheptahydrate  ELISAKitSMM人平滑肌肌球蛋白规格:48T/96T  大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)试剂盒 Rat α2 macroglobulin,α2 MG ELISA Kit

呱西替柳(标准品)质量规格:含量测定Guacetisal  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒 ,英文名: α1-AGP ELISA Kit  CLIAKitforST1(HumanSomelysin-1)ELISAKit人基质裂解素规格:48T/96T

RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格:96T/48T  28649-60-7环氧续随子醇品牌  Epoxylathyrol  

载玻片细胞IGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  6873-13-8黄柏碱规格  Phellodendrine

Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme11BACE1ELISA试剂盒人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒规格:96T/48T  751-03-1黄柏酮厂家  Obacunone

小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-β1 ELISA Kit  40246-10-4黄豆黄苷说明书  Glycitin

小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA检测试剂盒MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T  40957-83-3黄豆黄素品牌  Glycitein

57-87-4甾醇厂家  Ergosterol   猪样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)试剂盒 Porcine IGFBP-3 ELISA Kit

578-74-5芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷品牌  Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside   猪样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T

57817-89-7甜菊苷厂家  Stevioside  猪样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)试剂盒 Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit

574-84-5秦皮素厂家  Fraxetin  猪样生长因子2(IGF-2)试剂盒 Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit

57420-46-9胡麻属苷品牌  Sesamoside   猪样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T

Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞操作方法:

1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。