判断原代细胞是否污染?需结合肉眼观察、显微镜检查与专项检测，培养基浑浊、颜色变黄、镜下可见快速运动的微小颗粒或丝状菌丝是主要判断依据。
一、肉眼观察（初步判断）
在换液或传代前，首先观察培养基状态：
浑浊度：正常培养基清澈透明，若出现雾状或乳白色浑浊，提示可能为细菌污染。
颜色变化：培养基由粉红/红色变为黄色，说明pH下降，常见于细菌代谢产酸；少数真菌污染可能导致变紫。
沉淀或漂浮物：出现白色、黄色颗粒沉淀（细菌聚集）或?棉絮状、丝状漂浮物?（真菌菌丝），可直接判定污染。
二、显微镜观察（精准确认）
在100–200倍倒置显微镜下观察细胞间隙和形态：
细菌污染：视野中可见大量微小杆状或球状颗粒，并在细胞间隙快速运动，细胞逐渐变圆、脱落。
真菌污染：可见丝状菌丝、圆形孢子或棉絮状菌落，菌丝常缠绕细胞，导致增殖停滞。
支原体污染：普通光学显微镜难以直接观察（体积仅0.1–0.3μm），但可间接发现细胞?空泡增多、增殖缓慢、贴壁差?等异常状态。
注意：支原体污染隐蔽性强，若细胞长期生长不良但无明显微生物迹象，建议使用?PCR或荧光染色法进行专项检测。
