优化C1q人抗补体1q抗体ELISA的重复性，关键在于系统性地控制试剂、样本、操作和仪器四大环节。以下是具体方案：
一、试剂优化
?抗体浓度滴定?
通过棋盘滴定实验确定捕获抗体（1-10 μg/mL）和检测抗体（0.5-5 μg/mL）的最佳浓度，确保信号强且背景低。
?封闭液选择?
使用BSA、脱脂奶粉或血清作为封闭液，延长封闭时间（2小时）或提高浓度，减少非特异性结合。
二、样本处理
?样本基质匹配?
确保试剂盒适用于血浆、血清等样本类型，避免基质效应干扰。
?样本预处理?
对样本进行透析、稀释或更换缓冲液，去除EDTA、NaN?等干扰物质。
三、操作规范
?孵育条件?
严格遵循说明书推荐的孵育时间和温度（37℃或室温），避免随意缩短时间。
?洗板操作?
使用推荐的洗液，温柔地加入和弃去洗液，避免高压洗板机直冲孔底。
?加样一致性?
控制加样时间（不超过10分钟），确保加样量一致，避免孔内稀释。
四、仪器校准
?酶标仪校准?
定期校准酶标仪，确保滤光片匹配和计算公式正确。
?温控一致性?
确保孵育环境温度恒定，避免温育时间及环境条件的波动。
五、质控验证
?标准品重悬?
标准品重悬时充分离心，避免试剂粘附于管盖或管壁，加入足量的稀释液，充分混匀。
?质控品设置?
设置阳性、阴性、无模板对照，验证反应有效性与排除污染。
