试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
图

产品全称：PLAP 人胎盘碱性磷酸酶ELISA检测试剂盒说明书
英文简称：PLAP ELISA Kit
货号：BKE8872
规格：48T/96T
服务：可提供免费代测服务，以及产品说明书和技术指导等
保存环境：2-8℃低温、避光、防潮
主要成分：酶标板,试剂,标准品等。
检测目的：用于测定血清，血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本..需要而未提供。

操作步骤：
1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。
6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。
7、温育：重复4的操作。
8、洗板：重复5的操作。
9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，37℃避光显色15min。
10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。
11、测定：以空白孔调零，在终止后15分钟内，用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。
12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各种应用软件来计算。zui终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。
检测流程图：

SV40T转化人脐内皮细胞;PUMC-HUVEC-T1 人膀胱成纤维细胞完全培养基 100mL雌二醇,β-雌二醇Estradiol质量规格：>98.0%,BR,可用于细胞培养

人角膜上皮细胞RNAHCEpiC miRNA5 μg雌二醇,β-雌二醇（标准品）Estradiol质量规格：HPLC>98%,标准品

EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) 雌三醇Estriol质量规格：>98.5%,BR,可用于细胞培养

水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S3雌三醇(标准品)Estriol质量规格：HPLC>97%,标准品

SW116细胞，人细胞 人葡萄膜色素细胞,UM细胞 人结直肠腺癌细胞;Caco-2*泊甙(进分)Etoposide质量规格：>98%,进分,sigma E1383
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA 瘤细胞，P388D1细胞 IF细胞，兔成骨C细胞2,5-二甲基环shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克

人胚肾细胞;293 [HEK-293]3-醇 3-Pyridinqmqthcnol 100-22-0

KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2,4-丁三醇shēng huà shì jì容量：25克

脑平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)ETHANOLANxy7noUS,DENATURED乙醇生物技术级无色液体RT不sigma

FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 14485-28-01酸二氢锌ZINC PHOSPHATE, MONOBASIC
IL22RA2 Others Rat 大鼠 IL22BP / L22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制剂 VII试剂级米白色固体COLDsigma

成纤维细胞生长添加物FGS3-录-4-拂本硼醋 3-Chloro-4-fluorophqnylboronic ccid 14443-82-9

Hs 578Bst细胞，人成纤维细胞 表达SV40T抗原人胚肾上皮细胞,293FT细胞 胰腺星状细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)ISOPROPYLALCOHOL异生物技术级透明无色液体RT不sigma

盘羊皮肤细胞;ASHS2N-羟基琥珀10毫克

S100A2 Others Human 人 S100A2 人细胞裂解液 (阳性对照) PeptoneSoy 250g/1kg 国产
PLAP 人胎盘碱性磷酸酶ELISA检测试剂盒说明书IGFBP4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 标签)沙美特罗-d3Salmeterol-d3质量规格：美国进口

GH3(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓神经元MN-dsc头孢吡1Cefepime质量规格：美国进口

小肠内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)二盐酸头孢吡1Cefepime dihydrochloride质量规格：美国进口

SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 洛索洛芬Loxoprofen质量规格：美国进口

正常大鼠肾细胞;NRK盐酸延胡索乙素Tetrahydropalmatine hydrochloride质量规格：美国进口
注意事项：
1. PLAP 人胎盘碱性磷酸酶ELISA检测试剂盒说明书使用前请保存在2-8℃。复溶后的标准品若未用完，请废弃。
2. 微量试剂运输中颠簸和可能的倒置，会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请1000转/分离心1分钟，以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象，微加热至40℃使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
（加热温度不要超过50℃）使用时洗涤液应为室温。
4. 不同批号的试剂盒组份避免混用（洗涤液和反应终止液除外）。
5. 充分轻微混匀对反应结果尤为重要，zui好使用微量振荡器(使用zui低频率)，如无微量振荡器，可在反应孵育前手工轻轻混匀。
6. 在试验中标准品和样本检测时建议作双孔检测。
7. 试验中所用的试管和吸头均为一次性使用，严禁在不同的液体之间混用！否则将影响试验结果。
8. 试验中请穿着试验服并带乳胶手套做好防护工作。特别是检测血液或者其他体液标本时，请按国家生物试验室安全防护条列执行。