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破梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P64684
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2021-01-21
  • 更新日期: 2024-04-29
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P64684
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 %
规格 50次
是否进口

公司产品仅用于科研实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

破梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒

50

BK-P64684

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
公司产品仅用于科研使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

SF763(人细胞) 5×106cells/瓶×2 J82(细胞)Christensen尿素琼脂500

CL-0060CHL(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×21--2-派啶醇 1-Mqthyl-2-pipqridinqmqthcnol 0842-34-2

AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP 人细胞裂解液 (阳性对照) 大肠杆菌&大肠菌群显色培养基30×3cm/

1酸(pNPP)1酸酶检测试剂盒pNPPItaconicacid亚甲基琥珀酸25AR98%

HOC1细胞,人细胞 C3H小鼠细胞,LM8细胞 食管平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)86227-47-6二十碳五1酸乙酯(+4)ALL CIS-5,8,11,14,17-EICOSAPENTAENOIC ACID etxyl ESTER
AGS 胃腺癌细胞米屈肼质量规格:>99%,BR,二水合物Mildronate,Meldonium

MADB-106-RFP-puro(慢病毒构建稳定株)大鼠癌细胞 MADB-106-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat breast carcinoma cell 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin米屈肼(标准品)质量规格:HPLC98%,标准品Mildronate,Meldonium

TGFB1 Protein Rat 重组大鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 标签)盐酸贝那普利/苯那普利质量规格:>98%,BRBenazepril

肾皮质上皮细胞(HRCEpiC)( 5×105 ) mCF, 小鼠*成纤维细胞 Mouse盐酸贝那普利/苯那普利(标准品)质量规格:含量测定Benazepril

大鼠癌细胞;MADB106苯扎贝特质量规格:>98%Bezafibrate
小鼠肥大细胞瘤细胞;P8151酸奥司他韦Oseltamivir phosphate 质量规格:>98%

KB细胞,口腔表皮样癌细胞 细胞,KYSE510细胞 家猫肾细胞;CATK11酸奥司他韦(标准品)Oseltamivir phosphate 质量规格:>98%,标准品

tTA基因修饰的小鼠(B);F9-CAG-tTA-3E5盐酸地布卡因Dibucaine HCl质量规格:>98%,USP,BR

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) 多奈哌齐Donepezil 质量规格:>98%

视网膜星形胶质细胞HRA多尼培南(标准品)Doripenem 质量规格:>99%,标准品,一水合物
人前脂肪细胞完全培养基 100mL海醇Iohexol质量规格:>98%,BR

MC细胞,大鼠巨噬细胞 THP-1(人单核细胞) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A麦芽1酸化酶, 硫酸铵悬浮液Maltose Phosphorylase 5U/mg质量规格:BC Grade

EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)嗪草酮(>95%,植物激素级)Metribuzin质量规格:>95%,植物激素级

BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)4-甲基伞形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷MU-alpha-GAL质量规格:分子生物学级

破梭状芽孢杆菌染料法荧光定量PCR试剂盒人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3粘酸(>98%BC)Mucic acid质量规格:>98%BC