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猪托克特诺病毒(猪细环病毒)染料法荧光定量PCR试剂盒
物品单位 价格 品牌
2899 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P64721
  • 发布日期: 2021-03-13
  • 更新日期: 2021-05-18
产品详细说明
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P64721
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 %
CAS编号
规格 50次
是否进口

公司产品仅用于科研实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

猪托克特诺病毒(猪细环病毒)染料法荧光定量PCR试剂盒

50

BK-P64721

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
公司产品仅用于科研使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO细胞裂解液 (阳性对照) S-乙酰丁二1shēng huà shì jì容量:100毫克

人肝窦内皮细胞裂解物HHSECL二二醇单迷 2(2-qthoxyqthoxy)qthcnol 111-90-0

小香猪皮肤细胞;SSC-S2 组织细胞瘤细胞,U-937细胞 NUTU-19细胞,大鼠卵巢癌细胞株嶙酸shēng huà shì jì容量:100

SV40转染人成骨细胞;hFOB 1.19L-鸟酸乙酯盐酸盐shēng huà shì jì容量:1公斤

HA Others H1N3 甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 2079-89-23-基富马酸盐3-AMINOPROPIOnitnILE FUMARATE
导管瘤细胞;BT-4742,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene质量规格:>98.0%(T)

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) S-乙酰半胱氨酸盐酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine 质量规格:>98%,BR

CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mLO-叔丁基-L-苏氨酸甲酯盐酸盐O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester 质量规格:0.98

Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(成纤维细胞)L-丙氨酸异丙酯盐酸盐L-Alanine isopropyl ester 质量规格:>98%

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1L-天冬酰胺甲酯盐酸盐Methyl L-asparaginate mono质量规格:0.98
*微血管内皮细胞cDNAHCMEC cDNA溴化胆,从牛脂来(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat质量规格:>98.0%(T)

SLPI Others Human  SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胆壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate质量规格:>89.0%(GC)

大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6胆壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate质量规格:

95-D细胞,高转移肺癌细胞 喉癌细胞,M2e细胞 正常大鼠肾细胞;NRK胆庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate质量规格:

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2胆油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate质量规格:>70.0%(HPLC)
RWPE-2(人前列腺正常细胞) 5×106cells/瓶×2法莫替丁相关化合物BFamotidine Related Compound B质量规格:美国进口

HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠*瘤细胞)5×106cells/瓶×2 SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1非那西丁-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C质量规格:美国进口

人尿道上皮细胞RNAHUC miRNA5 μg非那西丁-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C质量规格:美国进口

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟西汀Fluoxetine质量规格:美国进口

猪托克特诺病毒(猪细环病毒)染料法荧光定量PCR试剂盒人主动脉内皮细胞完全培养基 100mL元盐酸氟西汀Meta Fluoxetine 质量规格:美国进口