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鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)PCR检测方法(荧光-PCR法)
物品单位 价格 品牌
3800 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P63977
  • 发布日期: 2021-02-21
  • 更新日期: 2022-05-30
产品详细说明
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P63977
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 详见说明书%
CAS编号
规格 50次
是否进口

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)PCR检测方法(荧光-PCR)

50T

BK-P63977

异常汉逊酵母变种   石蕊杀菌素链霉菌 Streptomyces litmocidini
嗜热脂肪地芽孢杆菌   浅灰链霉菌 Streptomyces griseolus
铜绿假单胞菌CMCC10104冻干粉   苏云金芽胞杆菌亚毒亚种 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus
间型酒香酵母   香菇
肉葡萄球菌   岛青霉
异型酒香酵母   铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)
 葡萄芽假丝酵母
实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

小鼠心肽(ANP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Metamizole 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S

小鼠心肽(ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Mesterolone 中文名:甲氢 分子式:C20H32O2 度:98.0%

小鼠心素(mouse ANP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Mestanolone 中文名:美雄诺龙 分子式:C20H32O2 度:98.0%

小鼠心素 英文名称: aialnaiureticpeptide 规格: 48T/96T 英文缩写: ANP  Methyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  139481-28-0 中文名: 分子式:C22H17N3O4 度:98.0% 关键词:

小鼠心肌转录因子GATA4ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Metamizole   68-89-3 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 度:98.0% 关键词:
C127 小鼠细胞 102(>97.0%(HPLC)(N))质量规格:>97.0%(HPLC)(N)Coumarin 102

FCGR3A Others Human  CD16a / FCGR3A 细胞裂解液 (阳性对照)  314(>98.0%(HPLC)(N))质量规格:>98.0%(HPLC)(N)Coumarin 314

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化);PC-12(高分化)异环1酰胺质量规格:>99%,USP,BR,可用于细胞培养Ifosfamide

IL10RB Others Mouse 小鼠 IL10RB / IL10R2 细胞裂解液 (阳性对照) 异环1酰胺(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Ifosfamide

KYSE450 食管癌盐酸普拉克索质量规格:>99%,EP6.8Pramipexole 2HCL monohydrate
XCL1 Protein Mouse 重组小鼠 XCL1 蛋白 (His 标签)罗汉树脂酚-4'-O-β-龙胆二糖苷(标准品)Matairesinol 4'-O-β-gentiobioside质量规格:HPLC98%,标准品

RBE(胆管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 细胞裂解液 (阳性对照) 石蕊Litmus质量规格:AR

小细胞肺癌细胞;NCI-H2097-O-甲基芦荟新甙A(标准品)7-O-Methylaloeresin A质量规格:HPLC98%,标准品

PTGFRN Others Cynomolgus 食蟹猴 EWI-F / PTGFRN 细胞裂解液 (阳性对照) 肉苁蓉苷A(标准品)Cistanoside A质量规格:HPLC98%,标准品

CL-0449SW 780(膀胱移行细胞癌)5×106cells/瓶×2芦荟新甙D(标准品)Aloeresin D质量规格:HPLC98%,标准品
Zolpidem    中文名:坦 分子式:C19H21N3O 度:98.0% 关键词: 小鼠卵泡休止素 英文名称: Mouse Follistatin 规格: 48T/96T 英文缩写: FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2 度:98.0% 关键词: 小鼠叉头框蛋白O3 英文名称: Mouse Forkhead Box protein O3 规格: 48T/96T 英文缩写: FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名:齐留通 分子式:C11H12N2O2S 度:98.0% 关键词: 小鼠脂肪甘油三酯酯酶(ATGLELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Zidovudine  30516-87-1  中文名:齐多夫定 分子式:C10H13N5O4 度:98.0% 关键词: 小鼠脂多糖(LPSELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Xanthorin  17526-15-7  中文名: 分子式:C16H12O6 度:% 关键词: 抗菌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
鳜鱼传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)PCR检测方法(荧光-PCR法)实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR